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常见问题
答: 1)在低压均匀电场下,获得高转染效率和高存活率;2)可进行不同细胞量转染(3×10<sup>7</sup>-1×10<sup>10</sup>);3)通过GMP车间生产的电转耗材,且通过环氧乙烷灭菌;4)操作简单方便。
关键词:
电转染仪,优势
答:电极类型进行设定:96孔板电极针常用电转体系为1×10<sup>6</sup> cell/(3-5)μg plasmid/100μl buffer。电转参数的设定主要与细胞的类型、选择的电转缓冲液以及选择的质粒有关。对于常见细胞的电转,参考细胞档案库。
关键词:
电转体系,电转参数
答:我们的电极是有使用寿命限制的。由于我们的电极采用的是生物亲和性不锈钢材料,材料中去除了锰、铬、镍等非生物亲和性的离子。所以电极针在经过一定次数的电击后,会出现表面氧化等情况,影响电转效果。所以一般情况下,每个电极在电转100个孔后,便不再建议继续使用。
关键词:
电极,使用寿命
电转过程中电极针上是否会有细胞粘附?若重复使用同一个电极进行电转操作,是否会造成不同组间电转结果的相互影响?
答:电极针上不会有细胞粘附。大量的实验测试表明,将电极针的直径调整为400μm时,能够消除电击过程中两个相邻电极间的液体张力,避免发生细胞粘附电极针的现象。若仅是电击参数的不同,重复使用同一个电极不会造成不同组间电转结果的相互影响,但若是电转缓冲液、质粒及细胞的均不同,我们建议将电极经75%酒精清洗处理后再重复使用。
关键词:
细胞粘附
答:我们电转耗材是无菌的,全过程可在超净台内操作,保证了操作过程中的无菌。如果电极重复使用,可将电极用75%的酒精进行喷洒或浸泡处理。再次使用前先通过紫外照射30mins,便可以保证后续重复使用的安全无菌。
关键词:
无菌